靶向检测的一般思路及经典案例解析

靶向代谢组学(Targeted Metabolomics)是代谢组学研究的重要组成部分,也是全代谢组研究的延伸与拓展。相对于全代谢组分析而言,靶向代谢组分析具有特异性强,检测灵敏度高和定量准确等几个特点。通过对血液、尿液或其他体液以及组织中某一类特定的代谢物(比如某条代谢途径中的代谢物)的富集与准确定量定性分析,一方面可以结合其它实验数据揭示相关的分子生物学作用机制,另一方面,也可以为后续代谢分子标志物的深入研究和开发利用提供有力支持。

3、岛津UPLC与AB QTRAP 6500的联用,实现了痕量物质快速、灵敏的定量检测;

4、Qtrap6500特有的扫描模式,实现了目标化合物一次进样同时定性定量,确证了方法的可靠性。

2、岛津UPLC与AB QTRAP 6500的联用,实现了痕量物质快速、灵敏的定量检测;

3、Qtrap 6500特有的扫描模式,实现了目标化合物一次进样同时定性定量,确证了方法的可靠性;

1、基于SPE的前处理方法,使得背景噪音小,信噪比高,提高了方法的灵敏度,满足了痕量物质的检测要求;

4、特有的MRM-IDA-EPI扫描模式,在完成定量的同时可以获得化合物的完整二级信息,同时实现了定量和定性,防止了假阳性事件的产生。

1、若客户提供已经处理好的样品(可以直接上机),务必用0.22μm滤膜过滤,并提供最终复溶样品的溶剂信息(一般是测样方法流动相的初始条件,防止溶剂效应)跑;

GCMS和LCMS两种平台各有优势,主要是由目标化合物的理化性质决定,GC-MS适合易挥发性、分子量不太大的化合物,而且,离子源为EI,碎片信息多,有成熟的图谱库,便于化合物检索,对于非挥发性成分则需要衍生化;而LC-MS离子源为APCI或者ESI源,适合做中等或强极性的化合物,分子量范围广,灵敏度高,前处理简单,但是LC-MS的价格要贵点,因此可以根据实际情况选择合适的检测平台。

首先,定量一定需要标准品的。在定性的同时对某些化合物定量需要视改化合物的浓度水平而定,一般做定性分析的仪器以高分辨质谱为主,因而,对一些含量很低的物质还无法实现定性定量同步进行。

没有标品无法实现定量分析,但是相对定量是可以的。如果只有少量标品,可以通过文献或者标准方法查找目标化合物的质谱参数,但是由于仪器之间的差异,这种方法灵敏度低,对于浓度水平较低的物质可能无法检测,定量也只能半定量。

通常为了消除前处理、基质效应、人为操作或仪器上的差异,内标法为首选方法,但是考虑到经济的制约,一般如果前处理回收率达标,基质效应小,操作标准化可以选择外标法。返回搜狐,查看更多

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